渔医考试网 发表于 2022-12-18 20:57:37

对虾EHP传播新途径!粪便成为一种新途径,高盐度加重疾病

      肝胰腺微孢子虫病 (HPM) 是由细胞内微孢子虫肝对虾肠胞菌 (EHP) 引起的,已在几种对虾中报道,包括:斑节对虾和南美白对虾。并且,EHP已在不同地区报告,包括:中国、印度尼西亚、马来西亚、越南、泰国和印度等亚洲国家。最近,位于西半球的委内瑞拉也报道了EHP。

一、首次研究确定:虾便可能成为EHP传染途径
      EHP在肝胰腺 (HP) 小管上皮细胞中引起病变,其主要临床症状是:生长缓慢,导致大小不一。漂浮在池塘水面上的白便和虾胃肠道变白色,也与EHP相关。在疾病的晚期,感染EHP的虾通常表现出:软壳、嗜睡、摄食量减少、空肠空道和慢性死亡。
      在已报告EHP的国家,如:印度、中国、越南和委内瑞拉,对虾养殖是在广泛的环境条件下进行的,包括:沿海海域、河口地区和内陆地区。例如,在印度东部的一些州,如:安得拉邦,池塘充满了与河口水混合的钻井水,导致养成池塘的盐度在0到30ppt之间波动,平均盐度约10ppt。相比之下,在该国西部的各州,如:古吉拉特邦,池塘水中的盐度可能在30至44ppt之间变化。在委内瑞拉西北部,一些养虾场位于马拉开波湖周围,那里的盐度在2到5ppt之间,而在委内瑞拉东北部,池塘的盐度介于20至40ppt之间,据报道,在高盐度和低盐度环境中都存在EHP。在这两个国家,高盐环境下EHP的发病率似乎更高,但迄今为止还没有研究评估盐度与EHP存在之间的可能关系。
      今天,笔者报告了一项研究的结果,以三种不同的盐度比较了EHP的感染性。
二、研究设置
      1、生物测定在亚利桑那大学的水产养殖病理学实验室 (UA-APL) 进行。无特定病原体 (SPF)南美白对虾购自美国佛罗里达州的一家商业孵化场。过去两年,在UA-APL对SPF虾苗进行了筛查,没有发现包括EHP等疾病。
      2、研究分为两个的EHP挑战,在这两个挑战中,虾都维持在2ppt、15ppt和30ppt三种不同的盐度下。对于每个实验挑战,六个90升的水箱中装满了对应于三个盐度水平的人造海水,每种盐度有2组池塘。每天早上测量温度调整为25摄氏度 (±0.6);每周测量一次pH值,范围为7.5-8.0。
      3、在每个水箱中分别抽取10尾SPF南美白对虾(2.0-2.1 克)用于实验EHP感染。
三、结果与讨论
      1、我们调查了三种盐度中EHP的患病率和严重程度:在实验室受挑战的条件下:高 (30ppt)、中 (15ppt) 和低 (2ppt)。组织病理学和 PCR 证实,在实验挑战中用作EHP接种源的粪便,足以让不同盐度下的虾生病。这项研究的结果提供了一种通过粪-口途径感染EHP的新方法。
      2、EHP挑战结束时的最终存活率很高,从90%到100%,在两个独立实验挑战的三个盐度中(表1)。在两个独立的挑战实验中,在所有盐度中,对照处理的存活率都是 100%。在3种不同盐度下,我们没有观察到暴露于EHP的虾的任何临床症状。
      3、挑战1中2ppt、15ppt和30ppt盐度的EHP的患病率分别为25%、33.3%和25%。在挑战2中,EHP在2ppt、15ppt和30ppt的患病率分别为33.3%、30.0%和87.5%。在第二个实验中,盐度为30ppt时严重程度更高。在挑战2中,30ppt的EHP感染虾群中有50%表现出G3级(中度至重度)和G4级(重度)病变。我们发现盐度与感染EHP的虾之间存在很强的关联,暴露于高盐度(30 ppt)的虾中EHP的患病率高于暴露于低盐度的虾(2ppt和15ppt的总和)。本研究中不同的严重程度如图1所示。
      4、以前的研究表明,一些感染途径包括同居、反向灌胃和直接肝胰腺注射EHP接种物。在这项研究中,我们首次报道了粪便可能是一种传染性污染途径。由于有害的行为和粪便中未消化的饲料(可能约为25%-30%)的存在,可以增加EHP的传播。
      5、维持在30ppt盐度的虾的组织学损伤更为严重。在50%受影响的虾中发现了中度至重度感染 (G3-G4)。相比之下,在盐度为2ppt的虾中,只有16%的虾表现出G3级感染水平,而在盐度为15ppt的虾中,只有0%的虾表现出G2-G4 级感染水平。三种不同盐度下EHP感染严重程度的差异,可能是由于盐度对孢子萌发的不同影响。孢子萌发的关键阶段之一是孢子内渗透压的增加。与30ppt的高渗环境相比,盐度的差异导致2ppt和15ppt 的低渗环境。
      6、硬度是本研究中使用的三种盐度不同的另一个变量,可能是影响孢子萌发的一个因素。低盐度 (2 ppt) 的硬度约为240 mg/L,而人工制备的海水为15ppt和30ppt,硬度分别约为787mg/L和1575mg/L。据报道,钙是激活许多细胞事件的重要第二信使,钙流入可能部分负责在较高盐度下,激活微孢子孢子萌发。
四、结论
      我们的研究结果表明,已知感染EHP虾的粪便,可以用作可靠的传染源。并且,EHP感染可在低盐度(即2ppt)下发生,但是在30ppt盐度时感染率和严重程度较高。这些发现对EHP流行地区的疾病管理具有重要意义。http://yuyitest.com/chanpin/bk.jpg
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